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神經(jīng)干細(xì)胞基的使用注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2014-10-28 點(diǎn)擊次數(shù):1557

   神經(jīng)干細(xì)胞基的使用注意事項(xiàng)

1.在配制*培養(yǎng)基前,請(qǐng)把間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)動(dòng)物源生長(zhǎng)添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素(P/S)放到2-8℃冰箱過(guò)夜解凍,然后加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
 
2.在使用*培養(yǎng)基前,需要把培養(yǎng)基放到37℃恒溫水浴中預(yù)熱,注意溫度不要超過(guò)37℃。
 
3.請(qǐng)把配制好的*培養(yǎng)基放在4℃冰箱避光保存,并盡量在一個(gè)月內(nèi)使用完。若培養(yǎng)基要分幾次使用,請(qǐng)將間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)動(dòng)物源生長(zhǎng)添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素 (P/S)解凍按用量分裝后保存。
 
4.可不包被培養(yǎng)瓶,但配合貼壁材料Attachin(貨號(hào)BW110028)使用效果更佳。
 

免疫細(xì)胞化學(xué)染色具體方法為:

(1) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(2) 0.3%H2O2/0.05M PBS室溫 30min

(3) 0.3%Triton-100/0.05M PBS 37 ℃,15min

(4) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(5) 5%羊血清/0.05M PBS 37 ℃,15min

(6) I抗(2%羊血清/0.05M PBS配) 4℃,48h

(7) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(8) II抗(2%羊血清/0.05M PBS配,1:200) 37 ℃,1.5h

(9) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(10) AB復(fù)合物(0.05M PBS配,1:100) 37 ℃,1.5h

(11) 0.05M PBS漂洗 10min×3次

(12) Tris-HCl緩沖液 37 ℃,15min

(13) DAB顯色 20min

(14) 蒸餾水漂洗 10min×3次

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